科研小白如何摸索自己的预实验

无论是学术大牛还是科研小白，在接触一个新课题时，往往是三个步骤：

首先，阅读大量相关文献，设计出自己的实验方案。然后，摸索预实验，获得一些经验和数据。最后，根据这些资料，决定是否推进正式试验。

其中，很重要的预实验不仅能节约实验经费，减少人力物力支出，最重要的是，能让你在做正式试验时「手儿不抖，稳如老狗」。

因此，今天给大家分享一下如何摸索自己的预实验。

首先，预实验必须要当做正式实验来对待（态度要放端正，这是必须的）。

预实验的每一步都需要详细规划，多方筹谋。不论是实验动物的选择，还是检测试剂的购买，都尽量和正式实验统一标准。

建议大家先把所有试剂和药物购买完毕后，再去购买实验动物。

因为动物会长胖，长胖后给药剂量就要增加，不仅多花钱，并且还容易影响实验效果。

笔者曾经提前将实验动物买回，但因为特殊原因没能购买到造模药物，最终只能忍痛割爱将动物赠送他人，白白亏了一笔血汗钱（那批老鼠在我这儿白吃白喝长得太胖，没办法用作造模）。

动物及试剂购买

首先需要考虑：实验动物品种、体重、性别、周龄（通常根据既往文献报道可以获得答案）、数量（需要考虑到实验有一定动物死亡率或者动物本身会打架互殴，因此需要提前购买足够的动物）。

动物购买的途径、安置的地点，饮食管理（一般实验室会有动物房，也可以从其他地方购买），动物免疫证明、伦理证明需要提前准备好。

实验相关的试剂和药物：

比如造模药物和器械，动物干预所需药物，阳性药物选择及购买（有些药物购买很困难，必须通过特殊程序才能买到）。如果涉及到有创操作，要提前准备好麻醉药物（麻药建议提前购买），手术器械。

需要了解自身实验平台能完成哪些技术（常见的有组织病理染色、Western Blot、PCR 等），实验仪器是否需要预约使用。

如果需要外送生物公司检测，需要提前联系好商家，以及了解清楚样本如何获取，如何运输。

饲养动物及干预

动物购买后需要将时间节点提前规划好，比如，第一周需要做什么？测量体重？观察饮食？测量需要的指标？

中间有无特殊操作？比如灌胃、测量体重、做 CT 检测、取血？……

第几周取材？取材需要哪些组织？预实验方案就要提前设计清楚以上内容。

取材及样品准备

取材需要提前到动物房禁食、称体重、取出动物、手术器械的消毒、组织固定所需要的试剂和 EP 管，Western Blot 和 PCR 所需要的样本储存条件。

比如冻存管、EP 管，是否需要冰块？是否需要液氮？取材当天需要多少人？是否需要请人帮忙？

如果所需要取出的样本较多，建议大家请人一起帮忙，流水线作业，这样能节省时间，并且能最大程度保证样品的质量。

如果请人，每个人需要负责哪一板块的工作，比如谁负责麻醉，谁负责取血液，谁负责取器官，谁负责拍照、谁负责器官储存，都需要提前规划交代清楚。

实验指标检测

如果是需要自己做的检测，比如常见的 Western Blot 、PCR，建议提前可以看看教程（无论是视频还是贴吧，都要自己多方参考）。有了一定的理论基础后，再向老师、师兄师姐学习经验和技术，如果实验平台的仪器需要提前预约，建议提前规划好使用的时间。

反复总结寻找答案

在整个预实验的过程中可能会出现很多问题。比如造模效果欠佳、灌胃操作不当、腹腔注射操作失误、麻醉药物使用不当等引起动物死亡。

每遇到问题都需要自己想办法解决，可以从导师、师兄师姐、文献、贴吧、视频教程等找到答案。

比如笔者曾遇到同样的麻醉药物给药，发现有的大鼠麻醉得很深，有的大鼠还活蹦乱跳，在反复尝试调整麻药浓度，给药剂量，更换麻醉方式，后来才发现是动物体重秤的准度有问题，导致体重秤得不准。

因此，需要自己反复琢磨到底是实验过程中哪一个环节出现问题，逐一排除。也要求在每一个实验步骤需要标准化，统一化，尽可能的排除干扰因素，这样方便在遇到问题最快的找到答案。

同时，建议每日总结，大到动物死亡原因分析，小到今日灌胃操作耗时多长时间。建议反复总结出每天实验的优缺点。

做任何一个操作之前，建议提前脑海中反复模拟，准备好相关工具和试剂，避免临用之际缺枪少药的，影响实验操作节奏和个人心情。

笔者曾经灌胃操作的时候发现药物竟然忘带了，只好重新回实验室准备，那真叫一个郁闷。

仔细记录每日实验过程

无论是硕士还是博士，导师给我们上的第一堂课往往就是交代我们要详细记好实验记录，只要是和实验相关的，无论是照片，还是文字，必须要及时事无巨细地详细记录。并且要备份好每一份实验记录。

我个人一般喜欢每天及时地记在「科研实验记录本」上面，然后拍照扫描成电子版储存在电脑和云端。

时间规划

首先，个人是不赞同每天 24 小时泡在实验室的，高效率是关键。

建议提前一天规划好第二天需要做的事情，按照代办事项的格式逐条列出，哪一个时间段需要做什么事情？

这样的好处有两点，一个是自己提前把时间预约好，可以留出足够的时间休息和娱乐；另一个是在执行计划的时候往往会有一种时间紧迫感，办事起来往往更高效且不会遗漏。

总之，预实验就是迷你版正式实验，希望小伙伴们在进行预实验的时候一定要尽可能地准备周全，这样才能最快的推进正式实验。