成软骨鉴定试剂盒(阿利新蓝—核固红染色法)
实验原理
阿尔新蓝,是一种大分子共轭染料,类铜钛花青染料,起初用于纺织纤维染色。这种阳离子染料与酸性基团结合,形成不溶于水的复合物。阿尔新蓝由含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。该异硫脲基呈中度碱性,使阿尔新蓝带阳离子。阿尔新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明,普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。阿尔新蓝不能沉淀糖原,但在pH2.5时,阿尔新蓝可以与结缔组织和软骨中的蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白发生反应。从而用来鉴定成软骨形成,染色结果会使得结缔组织以及软骨中的蛋白多糖及酸性粘蛋白呈鲜蓝绿色,经过核固红染液染色后的细胞核呈红色。
试剂盒组分
组分名称 |
C02002-1 |
C02002-2 |
阿尔新蓝染色液 |
10ml |
20 |
核固红染色液 |
10ml |
20 |
3%醋酸溶液 |
15ml*2 |
30ml*2 |
操作步骤
1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水洗数次;
2. 用3%醋酸水溶液洗涤;
3. 阿尔新蓝染液染10-30分钟;
4. 3%醋酸水溶液洗涤,吸水纸吸干;
5. 核固红染色液染细胞核2-3分钟
6. 水洗,常规脱水,透明,中性树胶封固。
7. 4℃避光保存12个月。