兔胃底成纤维细胞分离培养

【简介】

体外培养的成纤维细胞多为梭形、多角形和扁平星形等，其形态尚可依细胞的功能变化及其附着处的物理性状不同而发生改变，成纤维细胞是功能活动旺盛的细胞，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，核仁大而明显，细胞质弱嗜碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动；

【材料】

培养皿，手术剪，弯头手术镊，10%FBS的DMEM-G，双抗PBS或Hanks，75%酒精；

【方法】

1）取胃组织，预冷双抗PBS 或Hanks冲洗3~4次；

2）刮除内膜，钝性分离外膜，取外模纤维层，剪碎成1mm³组织块；

3）将组织块用无血清培液重悬，1000RPM/3min，弃上清；

4）组织块移入培养皿，少量培液湿润，放入37°培养；

5）静置3d后换液，4d左右会有细胞出，细胞扩增后隔天换一次培液，20%FBS的DMEM可很好的培养细胞；

【培养】

10%FBS的DMEM-G

【鉴定】

1）免疫荧光：

阳性：vimentin

阴性：α-SMA、Desmin