核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服务

核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）服务
（DH1008）

一、服务介绍
       核酸蛋白互作（RNA/DNA pull down、CHIRP-MS）用于目的RNA或DNA的互作蛋白验证或筛选，这三种技术是捕获RNA/DNA-蛋白复合体的*常用方法，结合western-blot实验可以验证某种蛋白是否与目的RNA/DNA互作，结合质谱技术可以高通量鉴定与RNA/DNA结合的目的蛋白。
       RNA/DNA pull down是研究体外条件下RNA或DNA与蛋白互作的重要技术。该技术通过体外转录目的RNA的一部分或全长，用生物素标记转录产物，再与链霉亲和素磁珠孵育使之固定在磁珠上，用以“pull down”互作蛋白，纯化的产物蛋白经特定抗体的western-blot实验，可验证某种蛋白与目的RNA/DNA是否有相互作用；纯化的蛋白经质谱鉴定，即可筛选到与目的RNA结合的蛋白。
       CHIRP-MS是研究体内条件下RNA与蛋白互作的技术。该技术在特定时间点用甲醛交联等方式固定细胞内RNA与蛋白及核酸的互作复合物，再利用生物素标记的探针及链霉亲和素磁珠纯化出与RNA结合的蛋白及核酸的复合物，分离产物中的蛋白质做质谱鉴定，即可筛选出与目的RNA结合的蛋白。
 
二、服务内容及价格

 
三、客户提供
1、目的基因、目的蛋白信息。（包括物种、序列或者ID，保密文件除外）
2、细胞株及培养信息
3、待测蛋白信息及检测所用蛋白抗体
4、相关文献（可选）。
 
四、服务流程
1）载体构建GST-靶蛋白融合表达载体
2）GST-靶蛋白表达
3）WB检测蛋白融合情况
4) 细胞裂解，获取总蛋白裂解液
5)  GST-pull down调取互作结合蛋白
6） 蛋白纯化
7） 数据分析及Result Figure处理
 
五、提交给客户结果
1、原始数据、结果图片（包括Input、阳性及阴性对照结果）；
2、标准实验报告（包括详细的材料与方法）；
3、SCI标准Result Figure。
 
六、服务项目说明
1.实验周期：具体需要根据实验情况而定。
2.对实验有特殊要求，请另询价。
3.双方签订合同后，收取50%首付后启动实验。